期刊简介
《检验检疫学刊》是由国家质量监督检验检疫总局主管,中国检验检疫科学研究院和中国检验检疫学会联合主办,《食品指南》杂志社编辑、出版,国内外公开发行的国家级科技期刊。现被中国核心期刊(遴选)数据库、中国科技论文与引文数据库(CSTPCD)、中国学术期刊网络出版总库、中文科技期刊数据库等著名检索机构全文收录,适合检验检疫技术人员、业务管理人员、质量监督技术人员、大专院校相关专业及企业有关科技人员阅读。
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- 杂志名称:检验检疫学刊杂志
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期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:
用FQ-PCR方法快速检测水产品中副溶血弧菌
焦红;王方金;程刚;翁文川;王伟毅;谢钧宪
关键词:荧光定量PCR, 副溶血弧菌, 定量检测试剂盒
摘要:[目的]采用荧光定量PCR技术,研制适合各层次实验室使用的,快速、准确地检测与鉴定食品中副溶血弧菌污染的定性、定量检测试剂盒.[方法]根据副溶血弧菌gyrase基因序列,设计并合成特异性引物和荧光标记探针,将扩增后的特异片断制成阳性模板,绘制标准曲线.以副溶血弧菌菌株8株及同源及非同源参考菌株24株,做特异性检测;将阳性污染菌按梯度加入阴性样品为模拟样本,做敏感性检测.同时使用PE7000型定量PCR仪和国产DA620微量荧光检测仪检测.[结果]该方法有良好的特异性:8株副溶血弧菌结果均为阳性,而其他24株菌株均为阴性(其中8株是弧菌科,其它15株分别来自不同的菌属);该方法有良好的敏感性:阳性模板浓度与定量曲线循环阈值之间具有良好的线性关系,相关系数达到0.9871.直接进行定量检测,则检测低限在102cfu/g;经过24小时增菌培养,检测低限可达2cfu/g.[结论]该方法特异性强、敏感性高,操作简便快速,能避免常规PCR方法易污染的缺陷,在国产仪器上测试同样取得较好的敏感性和特异性,便于基层实验室使用,具有很好的推广应用前景.
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