期刊简介

               《检验检疫学刊》是由国家质量监督检验检疫总局主管,中国检验检疫科学研究院和中国检验检疫学会联合主办,《食品指南》杂志社编辑、出版,国内外公开发行的国家级科技期刊。现被中国核心期刊(遴选)数据库、中国科技论文与引文数据库(CSTPCD)、中国学术期刊网络出版总库、中文科技期刊数据库等著名检索机构全文收录,适合检验检疫技术人员、业务管理人员、质量监督技术人员、大专院校相关专业及企业有关科技人员阅读。                

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检验检疫学刊杂志2005年第03期

牛朊病毒正常蛋白特异性片段的克隆表达和纯化

李炎鑫;马贵平;尹少满;田波

关键词:朊病毒, 牛朊病毒蛋白特异性片段, 原核表达, 纯化
摘要:[目的] 表达重组牛朊病毒正常蛋白特异性片段.[方法] 用所设计引物以聚合酶链式反应扩增出牛朊病毒正常蛋白特异性片段基因,利用DNA重组技术,将牛朊病毒正常蛋白特异性片段基因插入表达载体pET30a,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,将表达产物(包涵体)用8mol/L尿素溶解,在变性条件下用Cu2+氧化复性纯化.[结果] 重组表达质粒在大肠杆菌中得到了高效表达,目的蛋白分子量约为15KD,Western blotting分析表明,目的蛋白具有朊病毒蛋白的抗原特性,变性条件下用Cu2+氧化复性纯化得到电泳纯的重组蛋白.[结论] 这一工作为下一步制备抗体和进行结构、功能的研究打下扎实基础.