期刊简介
《检验检疫学刊》是由国家质量监督检验检疫总局主管，中国检验检疫科学研究院和中国检验检疫学会联合主办，《食品指南》杂志社编辑、出版，国内外公开发行的国家级科技期刊。现被中国核心期刊（遴选）数据库、中国科技论文与引文数据库（CSTPCD）、中国学术期刊网络出版总库、中文科技期刊数据库等著名检索机构全文收录，适合检验检疫技术人员、业务管理人员、质量监督技术人员、大专院校相关专业及企业有关科技人员阅读。
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- 杂志名称：检验检疫学刊杂志
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西尼罗病毒NS1蛋白的原核表达及其免疫原性研究
王彦芳；杨鹏飞；张丽萍；平芮巾；刑福彬；咸庆杰；胡孔新
关键词：西尼罗病毒, 非结构蛋白NS1, 原核表达, 免疫原性
摘要：[目的]采用大肠杆菌表达系统表达西尼罗病毒NS1蛋白,并对表达产物进行免疫原性分析.[方法]将 WNV NS1 基因克隆入pET30a载体,获得重组表达质粒pE130a - WNV - NS1,并转化入BL21感受态细胞,将表达产物进行 SDS - PAGE 和 Western - blot 分析,经 Ni+ 亲和层析纯化、阴离子交换层析后获得纯化的WNV NS1蛋白;将纯化产物免疫新西兰兔,获得的免疫血清作 ELISA 检测.将重组蛋白包板,检测 FOCUS 公司商品化试剂盒中的阳性血清.[结果](1) 重组 WNV NS1 蛋白获得表达并纯化成功.(2)Westem blot 结果显示表达的蛋白是带有His 标签的目的蛋白.(3)兔免疫血清的间接ELISA结果显示血清效价达到1:50000以上.(4)检测商品化试剂盒中的阳性血清,其OD450吸光值与阴性血清吸光值之比大于2.[结论]重组 NS1 蛋白能在大肠杆菌系统中获得表达;纯化产物具有免疫原性,而且可以作为抗原检测西尼罗病毒感染的血清,为进一步研究 NS1 蛋白的生物学特性及西尼罗病毒的诊断试剂奠定了基础.
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